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【菲罗门】维生素HPLC分析知多少?

2020-04-19 16:3100

维生素(Vitamin)是一系列有机化合物的统称,最先由波兰化学家卡西米尔∙冯克于1912年提出。

它是生物体所需要的微量营养成分,而一般不能通过饮食等手段获得。

维生素对生物体的新陈代谢起调节作用,适量摄取维生素可以保持身体健康,但过量摄取却可能会导致中毒。

维生素也是药店里保健品版块的热门品种。

但是ScienceDaily网站报道,近期,美国约翰霍普金斯大学发表在《内科年报》上的一份研究表明,几乎所有的维生素、矿物质和其他保健品都不能延长寿命或预防心脏病,而复合钙和维生素D补充剂可能会略微增加中风的风险。虽然这是可能存在争议的研究结果,但对于国内越来越热的维生素补剂市场也是起到了一定的降温作用。


维生素作为重要的食品或者饲料添加剂,在国标或者各种行业、企业标准都有涉及到含量的检测。本文分享一下我们对一些维生素分析的检测的案例:


一、食品中维生素ADE的测定(基于GB 5009.82-2016

第一法:食品中维生素A和维生素E的测定 反相高效液相色谱法

国标中用的是C30柱,水/甲醇的流动相体系,30 min的梯度方法,我们使用ACE C18-PFP,用磷酸溶液/乙腈体系,14 min的梯度方法就可以实现目标成分的分离,总体更节约分析时间。



第二法:食品中维生素E的测定 正相高效液相色谱法

国标中用的UPLC的酰胺基柱(1.7u150*3.0mm)或者HPLCSi 60硅胶柱(5u250*4.6mm),以适配不同实验室的仪器条件。

其中用硅胶柱的方法中流动相使用了环境不友好的二氧六环,我们在开发方法中避开了该溶剂,使用的流动相为正己烷和异丙醇。



第三法:食品中维生素D的测定 液相色谱-串联质谱法

固相萃取柱(硅胶):Superclean Silica 500 mg/6ml(货号:9B-T005-06500

色谱柱:ACE Excel C18 1.7um 100*2.1mm(货号:EXL-171-1002U

第四法:食品中维生素D的测定 高效液相色谱法

半制备正相高效液相色谱,色谱柱 ACE Excel SIL 5u 250*4.6mm(货号:EXL-127-2546U

反相液相色谱,国标为甲醇/=95/5的体系,我们用纯甲醇体系:



一、其他维生素分析应用(基于中国药典和其他企业标准)

维生素包括脂溶性和水溶性维生素,由于在色谱上表现差异很大,很多会选择不同的色谱柱来分析。

比如ChP. 2015中使用氨基柱来分析水溶性的维C银翘片中维C的含量,但也有用户反馈这个方法的稳定性不是太好:



另外,对于大极性的水溶性维生素,也有用HILIC柱来分析,如使用TitanK HILIC来分析能量饮品中的水溶性维生素(混标):



对于脂溶性维生素,除了TitanK C18,我们还有ACE C18-amide的应用,其中比较难分离维生素D2D3的分离度非常不错:




最后,如果大家有维生素分析的问题,欢迎咨询您专属的菲罗门工程师,我们可以提供案例分享、方法推荐和方法开发等服务,尽最大可能为您解决分析难题。


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